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[目的]构建玉米胚芽鞘负向重力生长时期的酵母双杂交文库,并对其进行评价。[方法]以玉米骨干自交系B73为材料,利用Trizol试剂提取玉米胚芽鞘在负向生长时期所表达的总RNA,再利用SMART技术构建酵母双杂交文库,并转化进酵母Y187中。[结果]试验得到的原始文库库容量高达1×106个单克隆;文库中插入的片段集中在0.5~1.5 kb,平均插入长度为800 bp。[结论]试验构建得到了高质量的米胚芽鞘酵母双杂交文库,为研究胚芽鞘的负向重力反应机制奠定了基础。 相似文献
92.
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酵母单杂交技术是一种体外分析DNA与蛋白质相互作用的技术。文章就酵母单杂交技术的原理、操作步骤、应用及其优缺点作了简要概括。 相似文献
94.
目的构建喉癌(Hep-2)细胞的酵母双杂交cDNA文库,为筛选包涵体膜蛋白分子的作用配体提供前期工作基础.方法从Hep-2细胞中提取总RNA,应用SMARTTM技术,构建以pGADT7-Rec为载体的Hep-2细胞酵母GAL4AD融合cDNA文库.结果所构建的文库展现出良好的多态性.结论可用于酵母双杂交系统的筛选. 相似文献
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硒是动物的必需微量元素之一.对动物的生产和健康具有重要的作用。酵母硒较无机硒有更高的吸收率和安全性。本文综述了酵母硒在猪、鸡、奶牛和水生动物上的应用研究进展。 相似文献
96.
益母草抗菌蛋白LJAMP2的表达及抗菌活性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
LJAMP2是一种分离自益母草(Leonurus japonicus Houtt.)种子的非专一性脂转移蛋白类抗菌蛋白.将编码成熟的LJAMP2蛋白的基冈(GenBank Accession No.AY971513)插入到巴斯德毕赤酵母(Pichia pas-toris)表达载体pPIC9K中;重组质粒pPIC9K-LJAMP2经线性化后,用电转化法导入毕赤酵母菌株GS115(his-/mut+)中.转化子用含1.75 mg/mL G418的YPD平板筛选获得多拷贝Mut+转化子.将1%甲醇诱导LJAMP2表达后的发酵液,经进一步浓缩、凝胶过滤脱盐、CM FF阳离子交换色谱和反相HPLC进行纯化,获得纯度90%以上的LJAMP2菌株诱导24 h即有LJAMP2的表达,诱导168 h表达量达到最高;表达的LJAMP2蛋白对黑曲霉(Aspergillus niger)、玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)、镰刀菌(Fusarium graminearum)真菌表现出抑制活性. 相似文献
97.
酵母多糖对鲤鱼生长和免疫功能的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
[目的]研究酵母多糖对鲤鱼生长和免疫功能的影响。[方法]用经超声提取的酵母多糖作为饲料添加剂。试验鲤鱼适应性驯化2周,对照组投喂基础饲料,试验组投喂添加0.1%酵母多糖饲料,每日投饵量均为体重2%,每天在9:00、20:00投喂2次,每次投饵1h后取出残饵。饲喂30d后测定鲤鱼的生长性能、摄食能力,白细胞吞噬功能、脾脏指数、血清溶血素活力、血清杀菌活力等。[结果]基础饲料中添加酵母多糖后,鲤鱼的生长性能和免疫功能相关指标都较对照组显著提高。[结论]为酵母多糖相关产品的开发应用提供试验依据。 相似文献
98.
利用酵母双杂交法检测甘蓝SCR与SRK之间的相互作用 总被引:3,自引:1,他引:2
为深入研究甘蓝S位点受体激酶(SRK)和S位点富含半胱氨酸蛋白(SCR)间相互识别的分子机理,以具有典型自交不亲和性的甘蓝D3为材料,利用巢式PCR分别扩增SRK胞外域(eSRK)和SCR,通过酵母双杂交检测二者之间的相互作用。并利用同源重组技术将eSRK与GAL4报告基因DNA活化域融合(pGADT7eSRK)以及SCR与GAL4报告基因DNA结合域融合(pGBKT7SCR)。两种重组质粒分别转化酵母Y187和Y2HGold后未出现自激活现象。融合的二倍体酵母(pGADT7eSRK× pGBKT7SCR)能在选择性固体培养基(SD/–Ade/–His/–Leu/–Trp/X-a-Gal/AbA)上生长,并且菌落呈蓝色。结果表明, eSRK与SCR蛋白能够相互结合, 为深入研究二者作用位点成功建立了一个技术平台。 相似文献
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100.